Evolução das técnicas diagnósticas em microbiologia clínica / Evolution of diagnostic techniques in clinical microbiology

Introdução: A identificação microbiana é importante por gerar impacto tanto no tratamento do paciente quanto na saúde pública, pois o diagnóstico rápido e preciso propicia o direcionamento adequado da terapia antibiótica e o rápido controle da infecção. Por conta disso, atualmente, os laboratórios de microbiologia clínica estão passando por mudanças significativas, com o desenvolvimento de sistemas de automação que aceleram o diagnóstico. Esses avanços foram possíveis devido ao progresso tecnológico e à busca de novas estratégias que reduziram os custos dessas ferramentas, tornando-as mais acessíveis. Objetivo: Este estudo buscou ressaltar a importância da implantação de novas e avançadas tecnologias nos laboratórios de microbiologia. Metodologia: Realizou-se revisão de literatura em bases de dados científicas. Desenvolvimento: As técnicas tradicionais de diagnóstico microbiológico incluem desde métodos diretos como coloração e microscopia ótica até métodos indiretos como, por exemplo, cultura e testes bioquímicos. O principal problema é o fato de que essas técnicas demandam tempo para fornecer uma resposta ao clínico e, em muitos casos, necessita de técnicos bem treinados para a interpretação correta dos resultados. Por isso, torna-se cada vez mais importante o desenvolvimento de técnicas rápidas e precisas. As principais técnicas inovadoras incluem a Biologia Molecular, os Imunoensaios e a Espectrometria de Massa. Considerações finais: O acesso às novas tecnologias permite resolver questões diagnósticas que estão cada vez mais desafiadoras e também contribuem para a melhoria do cenário clínico e a saúde pública.

Introduction: Microbial identification is important due to its impact on both the patient and public health, because the rapid and accurate diagnosis allows of correct antibiotic treatment and control of infection. Currently, clinical microbiology laboratories are undergoing significant changes due to the development of automation systems, which enables faster and more accurate diagnosis. These advances were possible due to technological progress and the search for new strategies that reduced the costs of these tools, making them more accessible. Objective: This study aimed to highlight the importance of the implantation of new and advanced technologies in microbiology laboratories. Methodology: A review of scientific literature was carried out in scientific databases. Development: Traditional techniques of microbiological diagnosis include direct methods such as staining methods and optical microscopy to indirect methods such as culture and biochemical tests. The main problem is the fact that these techniques take time to provide a response to the clinician and, in many cases, need well-trained technicians for the correct interpretation of the results. It is, therefore, becoming increasingly important to develop rapid and accurate techniques. The innovative techniques include molecular biology, immunoassays, and mass spectrometry. Final considerations: Access to new technologies makes it possible to solve diagnostic issues that are increasingly challenging and also contribute to the improvement of the clinical setting and public health.

Avaliação Da Atividade Antifúngica Dos Extratos Etanólicos Do Melão-De-São Caetano (momordica charantia l) frente a diferentes espécies de cândida / Evaluation of the antifungal activity of ethanolic extracts of the bitter melon (Momordica Charantia L.) Against different species of candida

Introdução: Leveduras do gênero Candida são reconhecidas por serem as espécies mais comuns envolvidas na etiologia das micoses. Objetivo: avaliar a atividade antifúngica dos extratos etanólicos do Melão-de-São-Caetano (Momordica charantia L.) frente a diferentes espécies de Candida. Metodologia: após aprovação pelo Comitê de Ética em Pesquisa, a coleta dos frutos e das folhas do Melão-de-SãoCaetano foi realizada na região da zona rural de Bauru-SP. Os frutos in natura e as folhas foram levados à estufa com circulação forçada de ar por 96 horas a 45°C, sendo, após esse período, submetidos ao processo de moagem em turbólise. Os triturados foram pesados e a cada 10g foram acrescentados 85mL de álcool 70%. Os macerados foram armazenados em erlemeyer, ficaram em repouso por 21 dias, foram devidamente embalados para que a luz não penetrasse na solução. Na sequência, o líquido foi filtrado a vácuo e o solvente evaporado em capela para obtenção dos extratos etanólicos. Os testes foram realizados em triplicata. Resultados: o extrato do fruto não apresentou capacidade fungistática (CIM) nem fungicida (CFM) na máxima concentração avaliada (1250µg/mL) sob as espécies de Candida utilizadas. Já o extrato da folha demonstrou ação fungistática (CIM) frente a todas as espécies de Candida, mostrando padrões diferentes nas concentrações (312,5µg/mL para C. albicans e 625µg/ mL para C. krusei, C. tropicalis e C. glabrata). O mesmo extrato demonstrou capacidade fungicida (CFM) nas espécies C. albicans e na C. tropicalis, nas concentrações 625µg/mL e 1250µg/mL respectivamente. Conclusão: o extrato da folha do Melão-de-SãoCaetano foi eficaz sobre todas as linhagens de Candida ensaiadas, sugerindo uma ótima alternativa terapêutica.

Introduction: Yeast of the candida gender are mostly related to etiology of mycosis. Objective: evaluate the antifungal activity of ethanolic extracts of the Bitter melon (Momordica charantia L.) against different species of Candida. Methodology: after the approval by the Research Ethics Committee, fruits and leaves of the Bitter melon were collected in the rural area of Bauru-SP. The fruits and leaves were taken to a greenhouse and kept with forced air circulation for 96 hours at the temperature of 45 °C. After that period, the samples were submitted to a grinding process in turbolysis. The grindings were weighed and each 10g received 85mL of alcohol 70%. The macerates were stored in an Erlenmeyer flask and were kept at rest for 21 days; after that, they were appropriately packed so that no light would penetrate in the solution. In the sequence, the liquid suffered a vacuum filtration and the solvent was evaporated in a hood to obtain the ethanolic extracts. The tests were performed in triplicate. Results: The extract of the fruit did not show fungistatic (CIM) nor fungicidal capacity (CFM) in the maximum concentration evaluated (1250µg/mL) against the species of Candida used. On the other hand, the extract of the leave showed fungistatic activity (CIM) against the other species of Candida, presenting different patterns in the concentrations (312.5µg/mL for C. albicans and 625µg/mL for C. krusei, C. tropicalis and C. glabrata). The same extract showed fungicidal capacity (CFM) in the species C. albicans and C. tropicalis, in the concentrations 625µg/mL and 1250µg/mL, respectively. Conclusion: the extract of the leave of the Bitter melon was effective against all Candida strains studied, suggesting this is a great therapeutic alternative.

Neurotoxoplasmose em pacientes imunocomprometidos e a relevância do diagnóstico por imagem / Neurotoxoplasmosis in immunocompromised patients and the relevance of image diagnosis

Introdução: a toxoplasmose é causada por um protozoário intracelular obrigatório, o Toxoplasma gondii. Felídeos, como gatos domésticos, são hospedeiros definitivos enquanto o homem é hospedeiro intermediário. Normalmente a infecção por T. gondii é assintomática e benigna, mas em indivíduos imunocomprometidos como portadores da AIDS, pode ocorrer reativação da doença crônica. Como o HIV apresenta neurotropismo, a neurotoxoplasmose é a causa predominante de distúrbios neurológicos nesses pacientes. As manifestações clínicas, principalmente os achados em exames de imagem específicos como a tomografia e a ressonância magnética do crânio, constituem a melhor forma de diagnóstico. Objetivo: neste contexto, analisou-se neste estudo a relevância do diagnóstico por imagem na neurotoxoplasmose em pacientes HIV positivos. Método: foi realizada uma revisão sistemática da literatura científica em bases de dados como: Bireme, Scielo, Medline, Google Acadêmico e Pudmed para os seguintes descritores: Diagnóstico por imagem, Neurotoxoplasmose, Sorodiagnóstico da AIDS, Ressonância Magnética e Tomografia Computadorizada. Foram incluídos na seleção artigos, teses, dissertações, atlas, livros, sites e guias em Português e em Inglês, publicados entre os anos de 1977 a 2015. Resultados e discussão: observou-se que dentre os exames de imagem mais utilizados, destacam-se a tomografia computadorizada (TC) com meio de contraste e a ressonância magnética (RM) de encéfalo, que costumam evidenciar múltiplas lesões com hipossinal, com reforço do contraste, envolvendo gânglios da base e córtex cerebral. Conclusão: o desenvolvimento de novas técnicas e critérios de diagnóstico é imprescindível para a exclusão de outras doenças do SNC, principalmente o linfoma e leucoencefalopatia multifocal progressiva, que podem ser confundidas nas imagens, principalmente no caso de lesão única.

Introduction: toxoplasmosis is caused by a mandatory intracellular protozoan, Toxoplasma gondii. Domestic cats are definitive hosts while humans are intermediate. Usually T. gondii infection is asymptomatic and benign, but in immunocompromised individuals as AIDS patients, reactivation of chronic disease may occur. As HIV presents neurotropism, neurotoxoplasmosis is the predominant cause of neurological disorders in these patients. The clinical manifestations, especially the ones found in specific image exams such as tomography and magnetic resonance of the skull are the best form of diagnosis. Objective: in this context, it was analyzed the relevance of image diagnosis in the neurotoxoplasmosis in HIVpositive patients. Methods: it was made a systematic review of the scientific literature in databases such as: Bireme, Scielo, Medline, Google Scholar and Pudmed, for the following descriptors: Image Diagnosis, Neurotoxoplasmosis, AIDS Serodiagnostic, Magnetic Resonance and Computed Tomography. It was included in the selection: articles, theses, dissertations, atlases, books, websites and guides in Portuguese and English, published between 1977 and 2015. Results and discussion: it was observed that among the most commonly used image exams, Computed tomography (CT) was highlighted with contrast medium and magnetic resonance image (MRI) of the encephalon, which usually show multiple hypersignal lesions with contrast medium enhancement, involving basal ganglia and cerebral cortex. Conclusion: the development of new techniques and diagnostic criteria is essential for the exclusion of other CNS diseases, especially lymphoma and progressive multifocal leukoencephalopathy, which can be misunderstood in the images, especially in the case of a single lesion.

Reuse of wastewater from pulp industry for the optimization of fungal xylanase production / Reutilização de efluentes da indústria de celulose para otimização da produção de xilanase fúngica

The production of enzymes using agro-industrial waste is a low cost alternative for the reuse of byproducts, with the subsequent impact decrease on the environment. Current analysis produced xylanase using fungus Aspergillus niger, with two types of wastewater generated during the pulp chemical bleaching phase as inducers. Xylanase was produced by submerged liquid fermentation and factorial design optimized parameters that influence production (concentration of wastewater and production period). Initial culture conditions (pH, temperature and agitation) were optimized independently. Alkaline wastewater was more effective than acidic wastewater for the induction of xylanase in optimized conditions: 50% of culture medium, 7-day production, 30°C, pH 6.0 and agitation at 160 rpm. Despite different results, acidic and alkaline wastewaters induced xylanase production by A. niger when employed in concentrations lower than or equal to 50% of culture medium and in the most optimal conditions described above. Alkaline wastewater is highlighted as the most efficient for such production.

A produção de enzimas, a partir de resíduos agroindustriais, é uma alternativa para reutilização destes subprodutos como substrato de baixo custo reduzindo seu impacto causado pelo descarte no meio ambiente. Diante disso, o objetivo deste estudo foi a produção de xilanase por Aspergillus niger, utilizando dois efluentes gerados nas fases de branqueamento químico de polpa de celulose como indutores. A produção de xilanase foi realizada por fermentação líquida submersa, e utilizou-se planejamento fatorial para otimização dos parâmetros influentes de produção (concentração de efluentes e período de produção) e as condições iniciais de cultivo (pH, temperatura e agitação) foram otimizadas de forma independente. O efluente alcalino se mostrou mais efetivo do que o efluente com característica ácida, na indução de xilanase em condições otimizadas: 50% em relação ao meio de cultura, sete dias de produção, 30°C, pH 6,0 e agitação de 160 rpm. Conclui-se que ambos os efluentes, ácido e alcalino, apesar de levarem a diferentes resultados, são capazes de induzir a produção de xilanase por A. niger quando empregues em concentrações menores ou iguais a 50% em relação ao meio de cultura e nas condições ótimas descritas acima, destacando-se o efluente alcalino como mais eficiente para produção de tal enzima.

Prevalência de Streptococcus agalactiae em secreção vaginal de gestantes atendidas em um laboratório de análises clínicas do interior do Estado de São Paulo / Prevalence of Streptococcus agalactiae in vaginal secretion of pregnant women attended at a laboratory of the interior State of São Paulo

Introdução: os agentes responsáveis por infecções graves em neonatais são geralmente oriundos da mãe, tendo como o grupo mais grave e predominante os Streptococcus do grupo B (EGB). Estas bactérias Gram-positivas, normalmente presentes no trato gastrointestinal, podem ser transmitidas da mãe para o feto através de transmissão vertical, gerando graves doenças em neonatos, com taxas de mor talidade de 50% e de colonização de aproximadamente 6 a 8% das gestantes. Objetivos: este estudo avaliou a prevalência de gestantes portadoras de Streptococcus agalactiae, atendidas no Laboratório de Análises Clínicas da Fundação Véritas da Universidade do Sagrado Coração no município de Bauru no período de 2013 a 2015. Material e Métodos: foram analisados laudos de exames de cultura de secreção vaginal de pacientes gestantes disponíveis no sistema Pleres, utilizando um formulário para coleta das informações. Resultados: os resultados demonstraram que no período de 2013 a 2015, das 560 culturas de secreção vaginal realizadas para pacientes gestantes cerca de 4,3% apresentaram-se positivas para S. agalactiae, sendo este percentual composto em sua maioria por atendimentos originários do Sistema Único de Saúde (SUS), além da prevalência de gestantes entre 20 e 29 anos. Dentre os antimicrobianos avaliados nos testes de suscetibilidade observou-se que S. agalactiae foi resistente, especialmente, à clindamicina. Conclusão: foram encontradas taxas de prevalência de S. agalactiae em gestantes menores que as médias observadas em outros estudos nacionais, com perfil de sensibilidade reduzido frente à clindamicina.

Introduction: the agents responsible for the serious infections in newborns are generally coming in the mother, having the Group B Streptococcus (GBS) as the most severe and prevalent group. These agents are Gram-positive bacteria that are normally found in the gastrointestinal tract and can be transmitted from the mother to the unborn baby by vertical transmission, which generates many severe diseases in mothers who have just given birth and newborn babies, with mortality rates at 50%, these bacteria colonize approximately 6 to 8% of pregnant women. Objectives: this epidemiological study aimed to evaluate the prevalence of pregnant women bearing Streptococcus agalactiae (EGB) in their birth canal and who were taken care of at the Fundação Véritas Clinical Analysis Laboratory of Universidade do Sagrado Coração in the city of Bauru, during the period 2013/2015. Material and methods: we analyzed exam reports of vaginal secretion culture tests for GBS of pregnant patients available in the Pleres system, using a form for collecting the information. Results and Discussion: the results showed that of 560 cultures performed during this period, 4.3% had S. agalactiae isolated, being that most of the patients were admitted by the Brazilian Sistema Único de Saúde (SUS) and had ages ranging from 20 to 29 years old. Among the antibiotics evaluated in the sensitivity tests, S. agalactiae proved to be resistant, especially, to clindamycin. Conclusion: it is believed that the decrease in the percentage of prevalence of S. agalactiae in this study in comparison to other researches was due to the changes in public policies and the implementation of screening protocols from 2013 for ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária).

Importância do diagnóstico por imagem na aspergilose invasiva pulmonar / Importance of image diagnosis on pulmonary invasive aspergilosis

Introdução: Aspergillus sp. são fungos filamentosos que tem como principal forma de contágio as vias aéreas e podem ser classificados como agentes sensibilizantes ou invasores, acarretando desde alergias a aspergiloses invasivas, dependendo do estado imunológico de cada indivíduo. Em pacientes imunodeprimidos são encontradas as formas mais graves da doença, sendo considerada uma das principais causas de óbito neste grupo de pacientes. O diagnóstico precoce e a terapia fúngica agressiva são essenciais para aumentar a sobrevida do paciente. Entretanto, o diagnóstico não é fácil fazendo com que o tratamento empírico seja iniciado como tentativa de impedir a progressão da infecção. Objetivo: este estudo buscou evidenciar a importância do diagnóstico por imagem na aspergilose invasiva, por se tratar de método não invasivo que contribui com o correto tratamento e diminuição dos índices de mortalidade por este tipo de infecção. Metodologia: realizou-se revisão de literatura científica em bases de dados científicas. Resultados e Discussão: os exames de imagem, em especial, a tomografia computadorizada de alta resolução (TCAR), têm sido usados como ferramenta essencial no diagnóstico de aspergilose invasiva, por se tratar de método não invasivo, rápido e de fácil acesso. Porém, os métodos tradicionais de diagnóstico como dados clínicos, cultura microbiológica e sorologia, não podem ser descartados, pois a confirmação da infecção se dá pela análise concomitante dos métodos. Recentemente, também a ressonância magnética passou a ser utilizada como método diagnóstico para doenças pulmonares, porém a análise do parênquima pulmonar através desta técnica ainda esta em fase experimental. Considerações finais: Ainda são necessários avanços nas técnicas diagnósticas, tornando-as mais específicas e capazes de evidenciar a aspergilose invasiva logo no início, acelerando a tomada de decisões quanto à terapia antifúngica, o que pode vir a contribuir com melhor prognóstico.

Introduction: Aspergillus sp. are filamentous fungi that have as main form of contagion the airways and can be classified as sensitizing or invading agents, leading from allergies to invasive aspergillosis, depending on the immunological status of each individual. In immunodepressed patients, the most severe forms of the disease are found, being considered one of the main causes of death in this group of patients. Early diagnosis and aggressive fungal therapy are essential to increase patient survival. However, the diagnosis is not easy so that the empirical treatment is initiated as an attempt to prevent the progression of the infection. Objective: this study aimed to highlight the importance of imaging diagnosis in invasive aspergillosis, because it is a noninvasive method that contributes to correct treatment and reduction of mortality rates due to this type of infection. Methodology: A review of scientific literature was carried out in scientific databases. Results and Discussion: image exams, especially high resolution computed tomography (HRCT), have been used as an essential tool in the diagnosis of invasive aspergillosis, because it is a non-invasive, fast and easily accessible method. However, traditional methods of diagnosis such as clinical data, microbiological culture and serology cannot be ruled out, since the confirmation of infection is confirmed by the concomitant analysis of the methods. Recently, magnetic resonance imaging has also been used as a diagnostic method for pulmonary diseases, but the analysis of the pulmonary parenchyma through this technique is still in the experimental phase. Final considerations: Advances in diagnostic techniques are still needed, making them more specific and capable of showing invasive aspergillosis at the beginning, accelerating decision-making regarding antifungal therapy, which may contribute to a better prognosis.